Одним из новейших подходов к улучшению когнитивных функций является применение пептидов, содержащихся в молочных продуктах. Новый лактопептид β-лактолин, разработанный японской компанией Kirin Holdings в 2018 году, улучшает когнитивные функции и оказывает антидепрессантный эффект, показывает эффективность на моделях болезни Альцгеймера. Пептид снижает утомляемость, оказывает благоприятное воздействие на когнитивные показатели, особенно на ассоциативную память и контроль внимания, у здоровых людей среднего и пожилого возраста может предотвратить возрастное снижение когнитивных способностей.

Снижение когнитивных функций и деменция часто присущи людям старшего возраста. Доля пожилого населения в мире растет и ожидается, что в период с 2015 по 2050 год увеличится с 12% до 22% [1]. То есть население в возрасте 60 лет и старше может вырасти в геометрической прогрессии ­– с 900 миллионов до 2 миллиардов, по расчетам ВОЗ. У 20% взрослых старше 60 лет диагностированы психические или неврологические расстройства, что ложится бременем не только для пациентов и их семьи, но и на национальные системы здравоохранения. Из-за отсутствия эффективной терапии деменции все большее внимание уделяется профилактическим методам. Последние эпидемиологические исследования показывают, что потребление некоторых молочных продуктов снижает риск снижения когнитивных способностей у пожилых людей и может предотвратить развитие болезни Альцгеймера. Биоактивные пептиды могут быть полезны для поддержания здоровой функции мозга во время старения. Сообщалось, что у людей, употреблявших раз в неделю молочные продукты с низким содержанием жира, включая йогурт и сыр, когнитивные функции были лучше, чем у тех, кто этого не делал, и ассоциировались с улучшением памяти, повышением социального функционирования и снижением стресса. Исследования продемонстрировали, что употребление молочного продукта, ферментированного Penicillium candidum (к примеру, сыр камамбер), оказывает профилактическое воздействие на патологические проявления болезни Альцгеймера в мышиной модели [2]. Было установлено, что профилактической активностью обладают олеамид и дегидроэргостерол, образующиеся в процессе ферментации плесневыми грибами. Однако они, вероятно, отвечают лишь за часть общей активности сыра камамбер, поскольку в процессе ферментации из белков молока образуются различные пептиды.

Экспериментально было показано, что некоторые пептиды обладают нейропротекторной активностью и улучшают когнитивные функции. Эти исследования побудили японских разработчиков из группы компаний Kirin Holdings, Ltd и Megmilk Snow Brand Company, Ltd к поиску пептидов из ферментированных молочных белков, которые могут улучшать когнитивные способности и усиливать память. В результате ими был выделен и изучен пептид β-лактолин. Kirin в настоящее время выпускает серию биологически активных добавок, содержащих β-лактолин или сумму лактопептидов, в виде порошков, йогурта и молока.

Открытие и общая характеристика

β-Лактолин (b-Lactolin, beta-Lactolin, β-Lactolin, Gly-Thr-Trp-Tyr GTWY) – природный тетрапептид с молекулярной массой 525,58 Да.

Рисунок 1 – Структура β-лактолина

Об обнаружении β-лактолина впервые сообщили в 2018 году при описании пептидов, полученных из сывороточных белков в процессе производства сыра, которые оценивали относительно способности влиять на когнитивные функции и особенно – на работу памяти [3]. Авторы идентифицировали и разделили с помощью ВЭЖХ пептиды сывороточного белка, гидролизованного протеазой P amano 3SD из плесневых грибов A. melleusили Thermoase C100 из B. Stearothermophilus. Также были определены аминокислотные последовательности полученных молекул. Среди пептидов, идентифицированных после обработки сывороточных белков протеазой Pamano 3SD, β-лактолин (GTWY) показал улучшение функции памяти у мышей, тогда как другие короткие пептиды не оказали заметного эффекта. Среди пептидов, полученных после обработки ферментом BacillusThermoase C100, Thr-Trp-Tyr-Ser (TWYS), Thr-Trp-Tyr (TWY), Val-Ala-Gly-Thr-Trp-Tyr-Ser (VAGTWYS) и Val-Ser-Leu-Pro-Glu-Trp (VSLPEW) были определены как относительно эффективные для улучшения функции памяти. За исключением VSLPEW, эти пептиды обычно содержали ключевой дипептид Trp-Tyr (WY). Сравнив действие этого дипептида и GTWY, авторы пришли к выводу, что именно WY является наиболее важной последовательностью пептида.

Проникновение пептида GTWY через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) было изучено с помощью меченого изотопами пептида Gly-ThrTrp-[карбоксил-¹⁴C]Tyr (¹⁴C-GTWY) на крысах [3]. Пептид ¹⁴C-GTWY попадал в кровь уже через 2 минуты после перорального введения, а его концентрация достигала максимума через 4 часа, что говорит о высокой биодоступности молекулы. Через 2 часа после перорального приема концентрация пептида ¹⁴C-GTWY в крови составляла 76,3% от C_max. Распределение радиоактивности в тканях через 1 час после перорального приема показало, что отношение концентрации в тканях к таковой в плазме составляло 0,32 в гиппокампе и 0,39 – в коре головного мозга. В распределении радиоактивности между различными областями мозга различий не наблюдалось. Эти результаты показали, что β-лактолин или его метаболиты проникают в мозг и непосредственно влияют на работу памяти. Кроме того, поскольку эффективная дипептидная последовательность состоит из Trp и Tyr, которые служат источниками моноаминов, после введения 10 мг/кг β-лактолина уровень дофамина в гиппокампе увеличился примерно в пять раз по сравнению с контролем. Однако концентрации других метаболитов дофамина, 3,4-дигидроксифенилуксусной кислоты и гомованилиновой кислоты, не изменились. Это указывает на возможность снижения скорости метаболизма дофамина в результате обработки пептидом GTWY. Эксперименты in vitro показали, что 1 мМ (0,53 г/л) пептида GTWY и дипептида WYпривело к 56% и 67% ингибированию активности моноаминооксидазы-B, соответственно, но ни один из них не влиял на MAO-A. Пероральное введение β-лактолина также подавляло активность MAO-B в мозге мышей. Эти подтверждает, что увеличение концентрации дофамина, вызванное введением β-лактолина, связано с ингибированием активности MAO-B. Ингибирование допаминовых рецепторов ослабляет улучшение памяти, вызванное пептидом GTWY.

В дополнение к биологическим испытаниям, авторы работы [3] количественно определили содержание β-лактолина в ферментированных молочных продуктах с помощью ЖХ-МС/МС: в полутвердых сырах – до 0,19 мкмоль/кг (0,001 мг/кг), в сыре Stilton – 0,27 мкмоль/кг (0,0014 мг/кг), в йогуртах – до 0,03995 мкмоль/л (0,00021 мг/л) и 0,02–3,2 ммоль/кг – (0,1–17 мг/кг)  в сумме пептидов сыворотки.

С момента открытия β-лактолин была проведена серия исследований на животных. Механизм действия изучен не полностью, но известно, что β-лактолин 1) повышает уровень нейромедиатора допамина и стимулирует нейроны по мере продвижения по мозгу, 2) стимулирует активность мозга, в частности – активность нейронов в префронтальной коре и гиппокампе, областях мозга, отвечающих за память [4]. Благодаря этому β-лактолин помогает сохранять способность к запоминанию.

Доклинические исследования на животных

В работе [3] авторы оценили действие перорального введения дипептида WY и β-лактолина в модели амнезии, вызванной 0,85 мг/кг скополамина. Мышей с амнезией, получавших перорально разовую дозу пептида GTWY, оценивали на пространственную память в Y-лабиринте и на гиппокамп-зависимую эпизодическую память в тесте распознавания новых объектов. Введение β-лактолина (50 и 500 мг/кг) привело к значительному улучшению спонтанного чередования, на 20%, и отсутствию изменений в заходах в рукав, а также привело к увеличению времени пребывания у проксимального нового объекта на 20–30%, по сравнению с контролем. Индекс распознавания в тесте на распознавание новых объектов также значительно улучшился у мышей, получавших GTWY – на ~0,2 пункта. Таким образом, введение β-лактолина улучшало не только пространственную рабочую память (тест Y-лабиринта), но и гиппокамп-зависимую память на предпочтение новых объектов (тест на распознавание новых объектов). Это подтвердило важность последовательности WY.

В другом эксперименте оценили влияние пептида GTWY на возрастное снижение когнитивных способностей у пожилых мышей [3]. Пожилым (22 месяца) и молодым (7 месяцев) мышам перорально вводили β-лактолин или гидролизованный сывороточный белок, богатый пептидом GTWY, а затем оценивали их действие в тесте Y-лабиринта и распознавания новых объектов. У пожилых мышей наблюдалось ухудшение памяти в обоих поведенческих тестах по сравнению с молодыми мышами. Введение β-лактолина или гидролизата сывороточного белка восстановило функцию памяти у пожилых мышей практически до уровня, характерного для молодых животных.

Депрессия является одним из наиболее распространенных серьезных психических заболеваний во всем мире [5]. Она характеризуется дисрегуляцией эмоций и настроения, что связано с нарушениями когнитивных функций, сна, аппетита и метаболизма. Более того, депрессивное расстройство является одной из основных причин инвалидности. К сожалению, многие пациенты не реагируют на доступные фармакологические или психологические методы лечения, а 50% не отвечают на фармакологическое вмешательство первой линии. Поэтому все больше внимания уделяется разработке новых антидепрессантов, включая профилактику с использованием диетических подходов.

Поскольку ранее было показано, что β-лактолин, ингибирует моноаминоксидазу и улучшает память у мышей, ученые предположили положительное влияние пептида на симптомы депрессий через дофамин-D1-подобный рецептор [6]. Для проведения исследования был приготовлен сывороточный гидролизат, содержащий 1,6 мг/г пептида GTWY. Чтобы оценить влияние пептида GTWY на эмоциональные нарушения, связанные с депрессией, авторы измеряли время неподвижности мышей в тесте TST. Однократное пероральное введение β-лактолина в дозе 0,3 и 1,0 мг/кг уменьшало время неподвижности в TST на 10–15 секунд. Далее оценили влияние сывороточного гидролизата, богатого пептидом GTWY, на эмоциональные нарушения, связанные с депрессией. Однократное введение сывороточного гидролизата в дозе 60 и 180 мг/кг аналогичным образом снижало время неподвижности в TST. Предварительная обработка SCH23390, антагонистом дофамина D1-подобных рецепторов, ослабляла уменьшение TST под действием β-лактолина. Активность мышей в тесте открытого поля не изменилась между группами, т. е., пептид GTWY не влиял на активность, но связан с улучшением депрессивно-подобного поведения. По результатам ВЭЖХ-анализа после TST, однократное введение β-лактолина в дозе 0,3 мг/кг повысило уровень дофамина в лобной коре на ~30%. Данное исследование позволяет предположить, что добавки β-лактолина или нутрицевтические соединения в сывороточных гидролизатах оказывают антидепрессивное действие.

Поскольку несколько исследований показали, что употребление ферментированных молочных продуктов, таких как сыр и йогурт, снижает риск когнитивного снижения и деменции, в работе [7] изучили роль гиппокампальной дофаминергической системы в эффектах β-лактолина. Результаты микродиализа in vivo показали, что пероральный прием β-лактолина повышал внеклеточную концентрацию дофамина в гиппокампе мышей и улучшал как пространственную рабочую память, измеряемую в тесте Y-лабиринта, так и пространственную ориентировочную память, измеряемую в тесте поиска новых объектов. Эти эффекты β-лактолина ослаблялись при нокауте подтипа рецептора дофамина D1 в гиппокампе. β-Лактолин также улучшал объектную память, измеряемую тестом на распознавание новых объектов. Результаты показывают, что пероральный прием β-лактолина увеличивает высвобождение дофамина и сигналы рецепторов D1 в гиппокампе, тем самым улучшая пространственную память, также пептид может улучшать предметную память, действуя через другой отдельный механизм.

В исследовании [8] авторы изучили влияние β-лактолина и сывороточного гидролизата, богатого β-лактолином, на патологию болезни Альцгеймера (БА) у трансгенных мышей 5×FAD и мышей с тауопатией PS19. Трансгенных мышей-самцов 5×FAD и мышей дикого типа кормили диетой, содержащей или не содержащей 0,05% пептида или 5% сывороточного гидролизата в течение 3,5 месяцев. Также, мышам PS19 и дикого типа давали корм, содержащий или не содержащий 0,05% β-лактолина или 5% гидролизата в течение шести месяцев. Суточная доза β-лактолина составляла 1,75 мг в группе, получавшей 0,05% пептида, и 0,28 мг – в группе, получавшей 5% гидролизата, когда общее потребление пищи составляло 3,5 г. Прием β-лактолина и сыворотки с высоким содержанием данного пептида снижал уровень воспалительных цитокинов на 10~50%, подавлял инфильтрацию активированной микроглии, снижал уровень амилоида-β примерно в два раза, устранял нарушения долговременной памяти на новые объекты, сокращая время узнавания до характерного для здоровых мышей, и ослаблял снижение выработки синаптофизина, дофамина, нейротрофического фактора мозга и инсулиноподобного фактора роста 1 в коре головного мозга у 5×FAD-трансгенных мышей. Кроме того, потребление β -лактолина и гидролизата улучшало поведенческие отклонения и снижало отношение фосфорилированного белка tau, характерного для патологической агрегации tau, к общему tau в коре головного мозга у мышей PS19 с тауопатией. Эти данные свидетельствуют о том, что употребление β-лактолина и гидролизованной сыворотки, богатой этим пептидом, подавляет воспаление и ослабляет патологию БА и когнитивные нарушения.

В другой работе также подтвердили, что β-лактолин уменьшает возрастное воспаление и когнитивные ухудшения [9]. В тесте на распознавание новых объектов показатель был снижен у мышей в возрасте 20 месяцев по сравнению с молодыми особями, что указывает на возрастное снижение когнитивных способностей. Также у них наблюдалось нарушение циклов активности при смене режимов свет/темнота. У пожилых животных, которых кормили пищей с 0,05% β-лактолина или 5% пептидов сыворотки (1,6 мг/г β-лактолина) в течение трех месяцев, ухудшение памяти было впоследствии ослаблено и достигало 80% от показателей молодых особей. Нарушение циклов активности впоследствии было нормализовано потреблением β-лактолина. Кроме того, количество активированных микроглий в гиппокампе и коре головного мозга и выработка цитокинов (фактор некроза опухоли-α, макрофагальный воспалительный протеин-1α и макрофагальный хемоаттрактант протеин-1) были увеличены у пожилых мышей по сравнению с молодыми, но снижены у пожилых, которых кормили β-лактолином. Возрастная атрофия гиппокампа улучшалась у пожилых мышей, которых кормили β-лактолином. Уровень цитохрома С в гиппокампе и коре головного мозга у пожилых мышей был повышен по сравнению с молодыми животными, но также снижался при потреблении β-лактолина. Эти результаты позволяют предположить, что употребление β-лактолина предотвращает нейрональное воспаление и облегчает связанное со старением снижение когнитивных способностей.

Клинические испытания

Когнитивные функции

Удачные эксперименты на животных и благоприятный профиль безопасности β-лактолина позволили исследователям быстро перейти к клиническим испытаниям на людях. Добавка сывороточного пептида, богатого β-лактолином, улучшает связанные с активностью лобной коры когнитивные способности у здоровых пожилых людей. [10]. В рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемого исследовании 2017 года 114 здоровых людей в возрасте 50–75 лет получали добавки с сывороточным пептидом (таблетки, содержащие 1 г сывороточных пептидов, которые включали 1,6 мг β-лактолина, приготовленные компанией Kirin, Co., Ltd) или плацебо в течение 12 недель (UMIN000030461). Изменения когнитивных функций оценивались с помощью нейропсихологических тестов на 0, 6 и 12 неделях вмешательства. Нейропсихологические тесты включали оценку функций памяти (субтесты из пересмотренной шкалы памяти Векслера, стандартный вербальный парно-ассоциативный тест обучения и тест памяти на распознавание лиц), оценку внимания (тесты отмены и обнаружения) и оценку общих когнитивных функций (повторяющаяся серия тестов для оценки нейропсихологического статуса). Церебральный кровоток оценивался с помощью спектроскопии в ближней инфракрасной области (NIRS) после шести недель вмешательства. В группе приема сывороточных пептидов визуальные тесты парных ассоциаций I и визуальные тесты отмены были значительно улучшены по сравнению с группой плацебо на 6-ой и 12-ой неделях вмешательства – 1,9 баллов против 0,7 и 0,1 против 0,02, соответственно. Показатели визуально-пространственных и конструктивных тестов повторяющейся батареи для оценки нейропсихологического статуса и стандартных вербальных парно-ассоциативных тестов обучения (S-PA) также имели тенденцию к улучшению в результате вмешательства на 12 неделе. Расчетная и логическая память изменялись незначительно. Ежедневный прием богатой β-лактолином суммы сывороточных пептидов оказывало благоприятное воздействие на когнитивные показатели, особенно на ассоциативную память и контроль внимания, у здоровых пожилых людей. Таким образом, β-лактолином может предотвратить возрастное снижение когнитивных способностей.

β-Лактолин увеличивает мозговой кровоток в дорсолатеральной префронтальной коре у здоровых взрослых [11]. Плацебо-контролируемое рандомизированное двойное слепое контролируемое исследование было проведено на 50 здоровых участников, в возрасте 45–60 лет, которые были рандомизированы в группу приема β-лактолина или плацебо (по 25 человек в каждой) и принимали добавки в течение шести недель. Тестируемые таблетки содержали 1,8 мг β-лактолина в ферментированной сыворотке в соответствии с предыдущим исследованием [10]. Авторы изучили влияние β-лактолина на мозговой кровоток (CBF) человека с помощью ближней инфракрасной спектроскопии (NIRS) на шестой неделе по содержанию оксигемоглобина, изменения которого имеют взаимосвязь со временем реакции на выполнение задач пространственной памятью. Данное клиническое исследование показало увеличение CBF в левой области DLPFC во время шестинедельного приема β-лактолина (Рис. 2).

Рисунок 2 – Топографические изображения распределения oxy-Hb во время работы пространственной памяти. Топографические карты A и B во время выполнения задачи показывают распределение регионального CBF на шестой неделе вмешательства для обеих групп (плацебо и β-лактолин, соответственно). Рисунок адаптирован из [11].

Для оценки влияния добавок сывороточных пептидов, богатых β-лактолином, на когнитивные показатели у здоровых взрослых, в возрасте от 45 до 64 лет, было проведено рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование [12]. Сто один испытуемый получал либо таблетки с β-лактолином (1,6 мг/г, как описано выше), либо плацебо в течение 12 недель. Изменения когнитивных функций с 0 недели вмешательства измерялись с помощью нейропсихологических тестов, оценивающих функции памяти (вспоминание слов, вспоминание историй и тест на беглость речи) и внимания и исполнительных функций (stroop-тест, прогон цифр и тест н беглости устной речи) на 6 и 12 неделях. Изменение показателей теста беглости устной речи (VFT), оценивающего способность к восстановлению долговременной памяти, через 12 недель в группе сывороточного пептида было выше, чем после приема плацебо. Анализ подгрупп показал, что у испытуемых с высоким уровнем субъективной усталости, измеряемой по визуально-аналоговой шкале, изменения показателей VFT, теста stroop, оценивающего торможение исполнительных функций, и субъективного теста на функцию памяти через шесть недель в группе сывороточного пептида были значительно выше, чем в группе плацебо. Изменение показателя VFT также было значительно [11] выше у испытуемых с высокой утомляемостью, определяемой по профилю настроения. Данное исследование показывает, что употребление сывороточного пептида GTWY улучшает когнитивные функции, особенно восстановление памяти и исполнительных функций, у здоровых взрослых среднего и пожилого возраста с высокой субъективной усталостью. Также предполагается, что функции префронтальной коры, особенно дорсолатеральной префронтальной коры, связаны с действием сывороточного пептида. Потребление 1 г богатого β-лактолином пептидного состава в повседневной жизни безопасно и просто, и может стать практическим подходом для поддержки когнитивных функций.

Подобные результаты описаны в работе [13], где влияние β-лактолина на региональный церебральный кровоток (rCBF) в дорсолатеральной префронтальной коре во время выполнения задания на работу памяти проверили на 114 здоровых участниках в возрасте от 50 до 75 лет с относительно низким уровнем когнитивных функций. Добровольцы были случайным образом распределены на группы β-лактолина или плацебо (n=57 для обеих групп) и принимали добавки в течение шести недель. Дизайн исследования был аналогичен вышеописанному. После завершения приема добавки общий гемоглобин во время выполнения когнитивных заданий (задания Kraepelin и 2-back) измерялся с помощью двухканальной NIRS для определения rCBF. Соответственно, в группе β-лактолина наблюдалось значительно большее изменение общего гемоглобина в левой дорсолатеральной префронтальной коре (DLPFC), измеренного с помощью левостороннего канала во время выполнения задачи 2-back (p=0,027), которое составило 105% по сравнению с группой плацебо. Исследование показывает, что прием β-лактолина увеличивает rCBF и активность DLPFC во время выполнения задач на работу памяти.

β-Лактолин повышает нейронную активность у здоровых взрослых [14]. В рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемом исследовании, результаты которого опубликовали в 2021 году, 30 участников (45–64 лет) принимали β-лактолин (таблетки, содержащие 1,6 мг β-лактолина в ферментированной сыворотке, Kirin Holdings Co., Ltd) или плацебо ежедневно в одно и то же время в течение шести недель. Нейронная активность во время выполнения слуховых и языковых задач измерялась с помощью 64-канальной электроэнцефалографии. Кроме того, на исходном уровне и через шесть недель проводились тесты на беглость речи. В результате в группе приема β-лактолина амплитуда Р300 в области Cp2 (часть теменной доли около центра мозга) и C4 (область между лобной и теменной долями) во время выполнения слуховых задач через шесть недель была значительно выше, на ~1 мкВ, чем в группе плацебо. Таким образом, прием β-лактолина способствовал повышению нейронной активности в теменной области, что повышает концентрацию и внимание во время выполнения слуховых когнитивных задач. По сравнению с группой плацебо, экспериментальная группа также продемонстрировала значительные изменения в баллах теста на беглость речи через шесть недель: баллы повысились на 0,5–1,9 единицы. Эти результаты дают представление о механизмах, лежащих в основе влияния β-лактолина на внимание у здоровых взрослых людей.

Дозировки и безопасность

Изначально дозировки для человека рассчитывались исходя из формулы эквивалентной дозы человека (ЭДЧ) (мг/кг)=доза для животного (мг/кг)×(К_м животного/К_м человека), где К_м человека=37, К_м мыши=3 [6]. Тогда, если доза мыши 60 и 180 мг/кг, то для человека она составляет 4,86 и 14,04 мг/кг, или же 291,6 и 874,8 мг сывороточного гидролизата для субъекта весом 60 кг. Позже в клинических испытаниях применялась обычная доза – 1,6 мг β-лактолина в виде пептида как такового, либо в составе сывороточного гидролизата.

Для оценки безопасности пептида молочной сыворотки собирались субъективные данные, а клинические обследования и медицинские опросы проводились исследователями. Пептид показал свою безопасность и отсутствие побочных эффектов. В исследовании [10] 30 человек в группе плацебо и 30 – в группе приема β-лактолина сообщили о нежелательных явлениях во время наблюдений, но ни одно из них не было связано с вмешательствами.

Заключение

Исследования выявили пептиды, содержащие последовательность WY, как компоненты молочных продуктов, важные для улучшения памяти и возрастного снижения когнитивных способностей. Потребление пептида GTWY, β-лактолина, и других WY-пептидов, а также сыворотки с высоким содержанием лактопептидовможет быть полезным для улучшения когнитивных функций в пожилом возрасте. β-Лактолин предотвращает развитие патологий болезни Альцгеймера и когнитивных нарушений на мышиной модели заболевания, а также оказывает антидепрессантный эффект.

Клинические испытания показали, что β-лактолин улучшает кровоснабжение мозга, снижает субъективную утомляемость, оказывает благоприятное воздействие на когнитивные показатели, особенно на ассоциативную память и контроль внимания, у здоровых людей среднего и пожилого возраста и может предотвратить возрастное снижение когнитивных способностей. Исследования показывают связь между ежедневным приемом сывороточных пептидов с высоким содержанием GTWY и улучшением ассоциативной памяти и контроля внимания. β-Лактолин демонстрирует высокую биодоступность, проникает через гематоэнцефалический барьер, является безопасным для человека и хорошо переносится. Ежедневное употребление сывороточных пептидов может стать практическим подходом к поддержке когнитивных функций, ухудшающихся с возрастом.

1.         Johnson, K., Son, M.Y., Mental health issues among the elderly population. 2021. DOI: https://scholarworks.lib.csusb.edu/cgi/viewcontent.cgi?article=2379&context=etd.

2.         Ano, Y., Ozawa, M., Kutsukake, T., Sugiyama, S., Uchida, K., Yoshida, A., Nakayama, H., Preventive Effects of a Fermented Dairy Product against Alzheimer’s Disease and Identification of a Novel Oleamide with Enhanced Microglial Phagocytosis and Anti-Inflammatory Activity. PLOS ONE, 2015. 10(3): p. e0118512. DOI: 10.1371/journal.pone.0118512.

3.         Ano, Y., Ayabe, T., Kutsukake, T., Ohya, R., Takaichi, Y., Uchida, S., Yamada, K., Uchida, K., Takashima, A., Nakayama, H., Novel lactopeptides in fermented dairy products improve memory function and cognitive decline.Neurobiology of Aging, 2018. 72: p. 23-31. DOI: https://doi.org/10.1016/j.neurobiolaging.2018.07.016.

4.         World’s first! Kirin Holdings Discovers Memory Benefits from β-Lactolin. 2021; Available from: http://www.kyowahakko-bio.co.jp/english/news/pdf/20210302.pdf.

5.         Depression. 2021; Available from: https://www.who.int/en/news-room/fact-sheets/detail/depression.

6.         Ano, Y., Ohya, R., Kondo, K., Antidepressant-Like Effect of β-Lactolin, a Glycine-Threonine-Tryptophan-Tyrosine Peptide. J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo), 2019. 65(5): p. 430-434. DOI: 10.3177/jnsv.65.430.

7.         Ayabe, T., Ano, Y., Ohya, R., Kitaoka, S., Furuyashiki, T., The Lacto-Tetrapeptide Gly-Thr-Trp-Tyr, β-Lactolin, Improves Spatial Memory Functions via Dopamine Release and D1 Receptor Activation in the Hippocampus. Nutrients, 2019. 11(10). DOI: 10.3390/nu11102469.

8.         Ano, Y., Ohya, R., Takaichi, Y., Washinuma, T., Uchida, K., Takashima, A., Nakayama, H., β-Lactolin, a Whey-Derived Lacto-Tetrapeptide, Prevents Alzheimer’s Disease Pathologies and Cognitive Decline. Journal of Alzheimer’s Disease, 2020. 73: p. 1331-1342. DOI: 10.3233/JAD-190997.

9.         Ano, Y., Ohya, R., Takashima, A., Uchida, K., Nakayama, H., β-Lactolin Reduces Age-Related Inflammation and Cognitive Decline. Frontiers in nutrition, 2021. 8: p. 724134-724134. DOI: 10.3389/fnut.2021.724134.

10.       Kita, M., Kobayashi, K., Obara, K., Koikeda, T., Umeda, S., Ano, Y., Supplementation With Whey Peptide Rich in β-Lactolin Improves Cognitive Performance in Healthy Older Adults: A Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Study. Front Neurosci, 2019. 13: p. 399. DOI: 10.3389/fnins.2019.00399.

11.       Ano, Y., Kobayashi, K., Hanyuda, M., Kawashima, R., β-lactolin increases cerebral blood flow in dorsolateral prefrontal cortex in healthy adults: a randomized controlled trial. Aging, 2020. 12(18): p. 18660-18675. DOI: 10.18632/aging.103951.

12.       Ayabe, T., Kita, M., Obara, K., Kondo, S., Umeda, S., Ano, Y., Effect of Supplementation of a Whey Peptide Rich in β-Lactolin on Cognitive Performance in Healthy Adults: Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Study.Proceedings of the Nutrition Society, 2020. 79(OCE2): p. E328. DOI: 10.1017/S0029665120002761.

13.       Ano, Y., Kita, M., Kobayashi, K., Koikeda, T., Kawashima, R., Effects of β-Lactolin on Regional Cerebral Blood Flow within the Dorsolateral Prefrontal Cortex during Working Memory Task in Healthy Adults: A Randomized Controlled Trial. Journal of Clinical Medicine, 2021. 10(3). DOI: 10.3390/jcm10030480.

14.       Kanatome, A., Ano, Y., Shinagawa, K., Ide, Y., Shibata, M., Umeda, S., β-Lactolin Enhances Neural Activity, Indicated by Event-Related P300 Amplitude, in Healthy Adults: A Randomized Controlled Trial. Journal of Alzheimer’s disease: JAD, 2021. 81(2): p. 787-796. DOI: 10.3233/JAD-201413.

 [I1]Количественных данных нет