Гепон – иммуномодулятор и противовирусный препарат

Агонисты рецепторов эритропоэтина не влияющие на эритропоэз
18.10.2019
Новый нейропротектор. FGL пептид
09.11.2019

(ВИЧ, гепатит, ИППП, герпес, бешенство, гнойная инфекция, алкогольная интокцикация, сальпингоофорит, эндометрит, заживление ран)

Гепон (Hepon) представляет собой синтетический пептид на основе 14 аминокислотных остатков:

Thr-Glu-Lys-Lys-Arg-Arg-Glu-Thr-Val-Glu-Arg-Glu-Lys-Glu (TEKKRRETVEREKE)

Препарат был разработан в США для профилактики и лечения синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД), системной красной волчанки (СКВ) и связанных с ними заболеваний [1]. Исследователи исходили из предпосылки, что основная проблема заключается в том, что реакции антител и цитотоксических Т-клеток, стимулируемые прототипными вакцинами, не способны защитить ни от ВИЧ-инфекции, ни от прогрессирования заболевания СПИД из-за быстрого уровня мутаций ВИЧ. Изобретение основано на избирательном снижении определенных иммунных ответов на ВИЧ с использованием пептидов, входящих в состав белков человека, в частности – человеческого белка эзрина (ezrin), который связывает молекулы клеточной поверхности с внутриклеточными филаментами актина. Также с помощью компьютерного поиска были исследованы аминокислотная последовательность ВИЧ в диапазоне от 498 до 510 положения (консервативная область С4) на С-конце ВИЧ gp120 (VHP1) и последовательностей в белках человека. В результате было установлено, что лекарственный пептид должен обладать, по меньшей мере, 50%-ной гомологией с аминокислотными последовательностями белков человека [1]. Этим требованиям полностью удовлетворил пептид Гепон.

Механизм действия Гепона заключается в способности индуцировать α- и β-интерфероны, ингибировать воспалительные цитокины – пептидные информационные молекулы воспалительного ответа – и стимулировать гуморальный иммунитет, действуя на клетки иммунной системы. Благодаря этому, Гепон обладает противовирусной активностью, способностью к активации местного иммунитета и противовоспалительными свойствами. Пептид усиливает выработку антител против антигенов ВИЧ, повышает концентрацию CD-4 (маркер Т-хелперов) и естественных клеток-киллеров, улучшает функциональность нейтрофилов и СВ-8 Т-клеток, снижает вирусную нагрузку в крови ВИЧ-инфицированных пациентов. Также, препарат мобилизует и активирует макрофаги. Гепон повышает резистентность организма в отношении инфекций, вызванных вирусами, бактериями, грибами. Благодаря изменению спектра синтезируемых организмом цитокинов, Гепон повышает функциональную активность клеток иммунной системы, активируя иммунную защиту организма. Гепон увеличивает синтез антител против любых антигенов инфекционной этиологии. Препарат значительно повышает эффективность иммунной защиты от разных инфекций и, в частности, от условно-патогенных (оппортунистических) инфекций. Кроме того, пептид оказывает противовирусное действие в клетках человека, инфицированных вирусом энцефаломиокардита, подавляет ВПГ-1, обладает противовирусной активностью по отношению гепатита С, герпеса 1 и 2 типов, бешенства, инфекций, передающихся половым путем, а также может быть использован при острых гнойных послеоперационных инфекциях [2].

В исследованиях in vitro оценивали противовирусную активность Гепона на культуре клеток человека, инфицированных гепатитом С. Пептид защищал клетки человека SW-13 от цитопатогенного действия вируса гепатита С. Максимальный противовирусный эффект был продемонстрирован при концентрации Гепона 1 мкг/мл. В качестве препарата сравнения исследователи использовали противовирусный агент интерферон α-2а. Последний оказался более эффективным в качестве защитного агента клеток SW-13 [3].

Клинические испытания in vivo по воздействию Гепона на вирус бешенства проводили на белых беспородных мышах, которым вводили 0,01–0,1 мкг препарата внутримышечно. В результате было выявлено, что препарат защищает 30–40 % мышей от заражения вирусом уличного бешенства. При этом пептид оказывает дозозависимый эффект ­– защита от заражения зависит от дозы и схемы применения препарата. Наиболее выраженная защита наблюдалась при его внутримышечном введении в дозировке 0,1 мкг. Следует отметить, что наиболее ярко выраженная защита проявлялась в рамках терапевтической схемы введения препарата после заражения животных вирусом [4].

Противовирусная активность пептидного иммуномодулятора Гепон при инфекциях, вызванных вирусами простого герпеса 1 и 2 типов, исследовалась in vitro в экспериментах с зараженными клетками. Максимальный противовирусный эффект был зарегистрирован в виде стократного снижения титра вируса при использовании Гепона в концентрации 6,25 мкг/л в качестве профилактической меры за 24 часа до введения инфекции. Эффект препарата был значительно выше, чем при его применении в рамках схемы лечения (через 1 час после начала инфекции). В исследовании in vivo на внутрибрюшинно инфицированных мышах Гепон обладал надежными защитными свойствами (36 % защиты со средним увеличением жизни инфицированной мыши на 1,9 суток). Дозировка составляла 0,1 и 1 мкг/мышь [5] .

В исследованиях по лечению последствий хронической алкогольной интоксикации (ХАИ), проведенных на 96 половозрелых крысах-самцах породы Вистар массой 150-200 г, не имевших внешних признаков заболевания, были изучены следующие сочетания иммуномодуляторов и мембранопротекторов: Гепон, гипоксен и фосфоглив; глутоксим, мексидол и гептрал. Состояние ХАИ вызывали принудительным внутрижелудочным введением 20 % раствора этанола в дозе 3 мл/кг в течение 60 дней. Животных делили на 4 группы по 11–12 особей в каждой: 1-я группа – контрольная, 2-я группа – острый деструктивный панкреатит (ОДП) и ХАИ; 3-я группа – ОДП и ХАИ с введением Гепона внутрижелудочно в виде 1 % крахмальной суспензии (1 мг/кг), гипоксена внутрибрюшинно (128 мг/кг) и фосфоглива (1500 мг/кг лецитина, 800 мг/кг глицирризиновой кислоты, внутрижелудочно в виде 1 % крахмальной суспензии, 4-я группа – ОДП и ХАИ с введением глутоксима (32 мг/кг, внутримышечно), мексидола (5 мг/кг, внутримышечно) и гептрала (34 мг/кг, внутрибрюшинно). Все препараты вводили в течение 15 дней каждый день, начиная с 45 суток алкоголизации. Смертность экспериментальных животных во 2–4-й группах в течение пяти дней после моделирования ОДП соответственно составила 69 %, 58 % и 44 %. Было установлено, что применение сочетания Гепон, гипоксен и фосфоглив нормализует 22,5 % измененившихся в условиях ОДП и ХАИ параметров, корригирует 42,5 % и оставляет без изменения 35 %, что свидетельствует о наличии полезного потенциала этого препарата [6, 7].

Дисбактериоз кишечника часто наблюдается у детей, страдающих вирусным гепатитом. В клиническом исследовании из пациентов с поставленным диагнозом вирусный гепатит (77 детей в возрасте от 3 до 14 лет) были отобраны две группы. Первая группа – 39 пациентов (20 с гепатитом А, 10 с гепатитом В, 9 с гепатитом С) получала специальную диету и желчегонные препараты, но не получала противовирусных или иммуномодулирующих препаратов. Вторая группа – 38 пациентов (18 с гепатитом А, 13 с гепатитом В и 7 с гепатитом С) были подвергнуты терапии с помощью Гепона по нижеприведенной схеме. Пациенты с острым гепатитом получали 1 мг Гепона дважды в день в течение 7 дней; больные хроническим гепатитом получали 1 мг Гепона в два раза в день в течение 30 дней. У пациентов, страдающих острым гепатитом (гепатит А), действие Гепона привело к быстрому обратному изменению в динамике клинико-биохимических показателей проявления заболевания. Например, симптомы интоксикации склеры были устранены на 1–3 дня раньше, чем в группе 1. Желтизна кожи и склер исчезла через 9–11 дней от начала лечения Гепоном, в то время как у пациентов первой группы желтизна перестала определяться только на 7–18 день от начала наблюдения. Нормализация размеров печени у группы, подвергшейся лечению Гепоном, происходила через 12-–3 дней от начала лечения, в отличие от другой группы (до 20 дней). Биохимические показатели также нормализовались быстрее у больных гепатитом А, которых лечили Гепоном. Таким образом, уровень общего билирубина в конце курса лечения был почти нормализован. Близкая картина наблюдалась и у больных с гепатитом В. Под влиянием Гепона было отмечено улучшение показателей микрофлоры гомеостаза кишечника у больных острым гепатитом. Исследования показали, что иммуномодулятор Гепон обладает значительной эффективностью при острых и хронических вирусных инфекциях, а также способствует нормализации микрофлоры кишечника, которая нарушается у больных в период обострения заболевания. Принципиально важно, что Гепон способствует снижению активности патологического процесса и подавляет репликацию ВГС при заболевании гепатитом С, что подтверждено снижением среднего титра РНК вируса гепатита С с 1:2683 до 1:268 к концу даже короткого (один месяц) курса Гепона. Что же касается группы № 1, титр РНК ВГС не снизился. Ингибирование Гепоном репликации ВГС у пациентов с гепатитом С совпадает с результатами предыдущих экспериментальных исследований, в которых было показано, что Гепон препятствует репликации ВГС и защищает культуру клеток человека от цитопатогенного действия этого вируса. Полагают, что положительный эффект Гепона в подавлении репликации ВГС обусловлен его влиянием на систему клеточных цитокинов, включая интерфероны. Положительное противовирусное действие Гепона показано также и при других вирусных инфекциях – энцефаломиокардите и простом герпесе [8].

Исследование, проведенное в Клинической инфекционной больнице № 1, г. Москва, продемонстрировало успешность сочетания терапии рекомбинантным интерфероном-α с Гепоном, что позволило уменьшить побочные эффекты интерферона, не снижая эффективности противовирусного лечения. В эксперименте участвовал 21 пациент (12 женщин, 9 мужчин, возраст 18–55 лет) с хроническим гепатитом С. Диагноз хронического гепатита С основывался на наличии в крови больных специфических антител к ВГС в течение периода не менее 6 мес. Все получали терапию рекомбинантным интерфероном-α в дозе 3 млн. МЕ 3 раза в неделю. 11 пациентов получали дополнительно Гепон по 0,002 г per os (препарат растворяли в 5 мл воды, экспонировали 2-3 мин во рту, затем проглатывали) 1 раз в день, ежедневно в течение 3 мес. У пациентов, получавших противовирусную терапию интерфероном в сочетании с Гепоном частота жалоб на общую слабость снизилась с 54 % до 18 %, артралгии – с 27 % до 18 %. Раздражительность в первый месяц лечения стали отмечать 54 % пациентов, в последующие месяцы лечения этот показатель снизился до 18 %. Эти показатели были значительно ниже, чем в группе, получавшей монотерапию интерфероном. Полученные результаты свидетельствуют о позитивном влиянии Гепона на переносимость терапии интерфероном у больных ХГС. Кроме того, угнетающее влияние лечения на репликацию вируса было более эффективным, чем в группе, получавшей интерферон без Гепона. Авторы обосновано делают вывод, что комбинация этих двух препаратов позволяет улучшить качество жизни пациентов [9].

Известен клинический случай применения препарата Гепон при гепатите B. Четырехлетний пациент из Камеруна был хронически заражен вирусом гепатита В. В течение девяти месяцев он безуспешно проходил терапию препаратом Интрон, который вызывал у пациента тяжелые побочные эффекты. Интерферонотерапия была заменена применением Гепона. Уровень вирусной нагрузки существенно не изменился после лечения Гепоном. На фоне лечения препаратом наблюдалось увеличение АсТ с 32-57 Ед/л и АлТ с 42-128 Ед/л [10].

Гепон был исследован как потенциальный препарат против инфекций, передающихся половым путем (ИППП). В эксперименте приняли участие 35 человек (23 мужчины и 12 женщин в возрасте от 22 до 63 лет), страдающих рецидивирующим генитальным герпесом. В зависимости от схемы лечения пациенты были разделены на две группы. 1-я группа (9 мужчин) принимали Гепон по следующей схеме: внутрь по 1 дозе один раз в день, ежедневно (3 дня). Для местного применения растворяли препарат в 5 мл воды для инъекций с последующим смачиванием очагов поражения 2–3 раза в день, ежедневно (7 дней). Для местного лечения генитального герпеса в виде монотерапии (2-я группа) 26 пациентам (14 мужчин и 12 женщин) применялся крем «Гепон», содержащий 0,002 г препарата в 6 г кремовой основы. Крем наносили тонким слоем на герпетические очаги поражения кожи 2–3 раза в день (до купирования рецидивов), Критериями эффективности служили показатели длительности и частоты рецидивов. После проведенного лечения у больных 1 группы длительность рецидивов сократилась и составила у 3 пациентов – четыре дня, у 6 – пять дней. У больных 2 группы длительность рецидивов генитальной герпетической инфекции также значительно сократилась и составила у 10 больных– четыре дня, у 16 – пять дней. Кроме того, была изучена эффективность монотерапии Гепоном (внутрь) в комплексе лечебных мероприятий до назначения этиотропной терапии у 16 больных мужчин (18–50 лет) со смешанной (сочетанной) кандидозно-трихомонадной инфекцией урогенитального тракта. Все пациенты принимали «Гепон» натощак внутрь, через день (3 дозы на курс) по следующей схеме: содержимое флакона растворяли в 5 мл воды для инъекций и вводили сублингвально за 4–5 минут, после чего не всосавшийся остаток проглатывался. На фоне проводимого лечения (на 2–3 день) у больных отмечалось значительное уменьшение или полное исчезновение зуда в уретре, болей при мочеиспускании, уменьшение проявлений баланопостита. При контрольном исследовании содержимого уретры у наблюдаемых больных сразу по окончании терапии Гепоном получены следующие данные: трихомонады не определялись у 9 и обнаруживались у 7 человек. Дрожжевые грибы рода Candida отсутствовали в микробиоценозе мочеполовых путей у 10 и обнаруживались у 6 пациентов. Таким образом можно считать, что иммуномодулятор Гепон является эффективным средством при лечении рецидивирующего генитального герпеса, позволяющим значительно ускорить эпителизацию и регенерацию пораженных вирусом герпеса тканей и снижающим клинические проявления инфекции при последующих рецидивах, что особенно отмечается при сочетанном применении препарата (внутрь и наружно) и позволяет в 2–3 раза сократить количество рецидивов в год [11].

Целью другого исследования являлось установление изменений метаболического статуса при обострении хронического сальпингоофорита (воспаление придатков матки) и выявление эффективности применения в комплексной фармакотерапии Гепона и различных лекарственных форм Лонгидазы. В эксперименте принимало участие 70 женщин в возрасте от 20 до 35 лет с установленным диагнозом хронический сальпингоофорит в стадии обострения. Из них, помимо стандартной схемы лечения, 18 пациентов получали Гепон (10 мг 1 раз в сутки в течение 5 дней). В результате исследования установлена эффективность применения иммунокорригирующих препаратов (Гепон и Лонгидаза) у больных хроническим сальпингооритом в стадии обострения в коррекции метаболических расстройств. Использование Гепона в дополнение к стандартной схеме лечения у пациентов с хроническим аднекситом в фазе обострения помогло скорректировать концентрацию в крови FNOα, IL-18, INFα, а также нормализовать уровень α1-AT и скорректировать активность каталазы при вагинально-цервикальном орошении раствором Гепона.  Применение в комплексной фармакотерапии больных хроническим сальпингоофоритом лонгидазы и гепона, по сравнению со стандартным лечением, оказывает более выраженное влияние на клиническую картину заболевания и лабораторные показатели [12].

Еще одно применение Гепона в области гинекологии, а именно – лечение хронического эндометрита с аутоиммунными нарушениями эндометрия, защищено патентом РФ [13]. Авторы рекомендуют вводить подогретый 0,02%-ный раствор гепона (2,0 мл) внутриматочно 1 раз в сутки в течение 10 дней для купирования воспалительного процесса, восстановления чувствительности эндометрия к собственным гормонам и восстановление секреторной активности гландулоцитов.  Эти рекомендации основаны на результатах лечении женщин репродуктивного возраста с хроническим эндометритом и аутоиммунными нарушениями в эндометрии и с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом (заметим, что в патенте приведен лишь один клинический пример)  [13].

Помимо перечисленных положительных эффектов, Гепон, путем MAPK-опосредованной активации фибробластов, способствует заживлению эрозии, язв и ран. Подробно молекулярные механизмы его воздействия рассмотрены в работе [14]. Однако, ранее изучалась эффективность иммуномодулятора Гепон в лечении острой гнойной хирургической инфекции мягких тканей в экспериментальных и клинических условиях [15, 16]. Гепон использовался в фазе регенерации раневой инфекции в виде 0,04% -ной мази при одновременном введении Иммуномакса в дозе 40 единиц в условиях эксперимента и 200 единиц в клинических испытаниях 3 раза каждые 2 дня внутримышечно; в качестве препарата сравнения использовали обычную 10%-ной метилурациловую мазь. Экспериментальное исследование было проведено на морских свинках на модели гнойной раны (плоские раны по методике А. В. Николаева) [16]. В клиническом исследований принимали участие 126 пациентов с острой хирургической инфекцией мягких тканей (постинъекционными флегмонами и абсцессами, флегмонозной и гангренозной рожей, карбункулами, инфицированными ранами мягких тканей, нагноением послеоперационных ран, нагноившимися посттравматическими гематомами и с флегмонами кисти). У пациентов группы, получавшей иммуномодуляторы, площадь раневой поверхности уменьшалась за сутки на 5 % быстрее, а полное заживление происходило на два дня раньше, чем у пациентов контрольной группы. Средние сроки очищения ран от гнойно-некротических масс в основой группе пациентов составили 9,9±1,2 дня, а в контрольной – 12,5±1,5 дня. Соответственно индекс «ускорения» составил 20,8 %, что говорит об успешном применении Гепона в комбинации с Иммуномаксом.  В целом, авторы наблюдали высокую терапевтическую эффективность Иммуномакса и гепона, и не обнаружили практически никаких противопоказаний и побочных реакций на их применение [15]. Также отмечена легкость и простота их использования.

Таким образом, имеющиеся на сегодняшний день данные подтверждают широкий спектр значимой биологической активности Гепона – от противовирусного действия до нормализации микробного гомеостаза и заживления ран. Это свидетельствует о широкой общей применимости иммуномодулятора Гепон в комплексной противовирусной терапии вирусных инфекций, в частности гепатита С и простого герпеса, а также многих других заболеваний.

В настоящее время Гепон зарегистрирован в России (регистрационное удостоверение ЛСР-001794/07) и производится компанией «Иммафарма». Препарат выпускается в виде лиофилизата для приготовления раствора для приема внутрь или наружного применения, содержащего 1, 2 или 10 мг активного вещества. Показаниями к применению являются:

  • ослабленный иммунитет при иммунодефицитных состояниях;
  • лечение ВИЧ-инфекции;
  • повышение иммунной защиты, лечение и профилактика оппортунистических инфекций, вызванных бактериями, вирусами или грибами;
  • поражение грибами Candida слизистых оболочек и кожи, профилактика кандидоза при применении антибиотиков;
  • уменьшение воспалительных изменений слизистых и кожи и при сухости слизистых оболочек.

При этом, препарат обладает низкой токсичностью, а также не описаны его побочные эффекты.

 

Список литературы.

  1. HIV peptides. US5773573A. 1998. Rupert, H.
  2. Silin, D.S., Lyubomska, O.V., Ershov, F.I., Frolov, V.M., Kutsyna, G., Synthetic and natural immunomodulators acting as interferon inducers. Current pharmaceutical design, 2009. 15(11): p. 1238-1247. DOI: 10.2174/138161209787846847.
  3. Ataullakhanov, R.I., Holms, R.D., Katlinskiĭ, A.V., Deriabin, P.G., Narovlianskiĭ, A.N., Mezentseva, M.V., Ershov, F.I., [Ani immunomodulator Hepon inhibits hepatitis C virus replication in human cell cultures in vitro]. Antibiot Khimioter, 2002. 47(8): p. 9-11.
  4. Gribencha, S.V., Kholms, R.D., Ataullakhanov, R.I., Barinskiĭ, I.F., [The antiviral activity of the peptide immunomodulator “Gepon” in experimental models of street rabies virus]. Vopr Virusol, 2003. 48(4): p. 40-44.
  5. Barinskiĭ, I.F., Alimbarova, L.M., Lazarenko, A.A., Ataullakhanov, R.I., [The antiviral activity of peptide immunomodulator “Gepon” in experimental infections caused by herpes simplex viruses types 1 and 2]. Vopr Virusol, 2003. 48(5): p. 30-33.
  6. Konoplja, A.I., Litvinova, E.S., Sunyaykina, O.A., Bushmina, O.N., Harchenko, A.V., Konoplja, A.A., [Disorders in structural-functional properties of erythrocytes in experimental acute destructive pancreatitis of alcohol etiology and their correction]. Biomed Khim, 2017. 63(6): p. 527-532. DOI: 10.18097/pbmc20176306527.
  7. Dolgareva, S.A., Sorokin, A.V., Konoplya, N.A., Bushmina, O.N., Bystrova, N.A., Ovod, A.I., The use of immunomodulators, antioxidants and hepatoprotectors for the correction of the liver, erythrocites and the immune system disorders in chronic ethanol intoxication. Biomed Khim, 2018. 64(4): p. 360-367. DOI: 10.18097/PBMC20186404360.
  8. Cherednichenko, T.V., F., U.V., Positive influence of pharmaceutical Gepon on the clinical laboratory indices and disbacteriosis of the bowel in children suffering from Viral Hepatitis. Russian Medical Journal, 2003. 11(8): p. 468-471.
  9. Горбарец, И.П., Воронкова, Н.В., Лопатина, Т.В., Ивановская, В.Н., Брагинский, Д.М., Опыт применения препарата “Гепон” в сочетании с рекомбинантным интерфероном-альфа у больных хроническим гепатитом С. Русский медицинский журнал, 2003. 12: p. 714.
  10. Schildgen, V., Ziegler, S., Tillmann, R.L., Schildgen, O., Novel mutation in YMDD motif and direct neighbourhood in a child with chronic HBV-infection and clinical lamivudine and adefovir resistance – a scholarly case. Virology Journal, 2010. 7(1): p. 167. DOI: 10.1186/1743-422X-7-167.
  11. Баткаев, Э.А., Рюмин, Д.В., Шаков, И.М., Иммуномодулятор «Гепон» в лечении герпетической и кандидозно-трихомонадной инфекций урогенитального тракта. Русский медицинский журнал, 2003. 11(17): p. 962-963.
  12. Abramova, S.N., Lazareva, G.A., Pharmacotherapy exacerbations of chronic inflammatory conditions of female genital sphere using to Gepon and Longidaza. Research Results in Pharmacology, 2016. 2(4): p. 55-67.
  13. Способ лечения хронического эндометрита с аутоиммунными нарушениями эндометрия. RU 2635518C2. 2017. Овчарук, Э.А., Лапочкина, Н.П.
  14. Chulkina, M., Negmadjanov, U., Lebedeva, E., Pichugin, A., Mazurov, D., Ataullakhanov, R., Holmuhamedov, E., Synthetic peptide TEKKRRETVEREKE derived from ezrin induces differentiation of NIH/3T3 fibroblasts. European Journal of Pharmacology, 2017. 811: p. 249-259. DOI: 10.1016/j.ejphar.2017.06.033.
  15. Чадаев, А.П., Нурписов, А.М., Пичугин, А.В., Атауллаханов, Р.И., Иммуномодуляторы Иммуномакс и Гепон в комплексном лечении больных с острой гнойной хирургической инфекцией. Русский медицинский журнал, 2004. 12(24): p. 1427-1433.
  16. Chadaev, A.P., Nurpisov, A.M., Experimental and clinical study of immunomodulators Immunomax and Gepon in complex treatment of acute purulent surgical infection. Antibiotiki i khimioterapiia [Antibiotics chemoterapy], 2004. 49(7): p. 9-16.